Antinavikinių terapijų sukeltą ląstelės žūtį lemiantys veiksniai kepenų karcinomos modelyje in vitro
Disertacinio darbo tikslas – ištirti vitamino C (VC), vitamino K3 (VK3) ir jų mišinio ir elektrochemoterapijos (ECT) su bisfosfonatais ir bleomicinu priešvėžinį potencialą kepenų karcinomos modelyje in vitro. Pirmą kartą įvertinta bisfosfonatų ir elektroporacijos derinio citotoksiškumas kepenų karcinomos modelyje in vitro. Gauti rezultatai, kad plazminės membranos pralaidinimas didina pamidronato ir nekeičia ibandronato citotoksiškumo. Disertacijoje įvertinti ląstelių mitybinės terpės aklimatizacijos prie hipoksinių sąlygų procesai, kuriais remiantis, sukurtas hipoksinis kepenų karcinomos modelis in vitro. Nustatyta, kad mitybinę terpę papildžius VC,VK3 ir VC+VK3 yra sunaudojamas ištirpęs deguonis, susidarant H2O2 – taip sukuriant laikinas hipoksines sąlygas. Taip pat, nustatyta, kad VC,VK3 ir VC+VK3 yra citotoksiški tirtosioms kepenų karcinomos MH-22A ląstelėms hipoksijos ir normoksijos sąlygomis. Šis efektas tiesiogiai priklauso nuo veikliųjų medžiagų koncentracijos ir ekspozicijos laiko. Taip pat nustatyta, kad nepasiekus efektyvios VC+VK3 koncentracijos galimas priešingas rezultatas – ląstelių proliferacijos skatinimas. Vertinant bleomicino ir elektroporacijos derinio citotoksiškumą nustatyta, kad ECT efektyvumas priklauso nuo ištirpusio deguonies kiekio sistemoje ir mažesnis deguonies kiekis mažina taikomo poveikio efektyvumą. Gauti rezultatai susieti su praktikoje taikomu ECT gydymu galimai paaiškinant neefektyvumo priežastis.
The aim of this study was to investigate the anticancer potential of vitamins C (VC) and K3 (VK3) as well as their mixture, electrochemotherapy with bisphosphonates and bleomycin in an in vitro model of liver carcinoma. For the first time, the cytotoxicity of the combination of bisphosphonates and electroporation was evaluated in liver carcinoma model in vitro. Plasma membrane electro-permeabilization altered the cytotoxicity of pamidronate but not ibandronate. Also, cell media acclimatization to hypoxia condition was evaluated and used to develop hypoxic liver carcinoma model in vitro. Also, it was found that cell media supplementation with VC, VK3 and VC + VK3 consumes dissolved oxygen, forming H2O2 - thus creating temporary hypoxic conditions. It was found that VC, VK3 and VC + VK3 are cytotoxic to MH-22A liver carcinoma cells under hypoxia and normoxia conditions. This effect depends on the concentration of active substance/s and the time of exposure in a direct manner. It was also found, that if a sufficient concentration of VC + VK3 is not reached, the opposite result is possible - stimulation of cancer cell proliferation. Assessing the cytotoxicity of the combination of bleomycin and electroporation was found that the efficacy of ECT depends on the amount of dissolved oxygen in the system and the lower oxygen content reduces the effectiveness of the applied treatment. The obtained results were linked to the clinical treatment of ECT, and the reasons for it’s ineffective.