Meškinių česnako (Allium ursinum L.) virusinės infekcijos sukėlėjai

Abstract

Šiame darbe pateikiami tyrimo duomenys apie Lietuvoje aptiktų meškinių česnakų (Allium ursinum L.) virusinius pažeidimus ir jų sukėlėjus. Aprašoma augalų radavietės ir pažeidimo simptomatika. Virusinių pažeidimų sukėlėjams išskirti ir identifikuoti buvo taikomi peršviečiamosios elektroninės mikroskopijos (EM), augalų indikatorių ir molekulinės biologijos (atvirkštinės transkriptazės– polimerazės grandininė reakcija, AT-PCR) metodai. Nustatyta diagnostinių augalų reakcija į patogenus ir jų pažeidžiamų augalų spektrai bei virionų morfologija. Tirtuose meškiniuose česnakuose identifikuoti trys skirtingoms gentims priklausantys virusai: agurkų mozaikos (Cucumber mosaic virus, CMV), tabako garbanotosios dryžligės (Tobacco rattle virus, TRV) ir tabako mozaikos (Tobacco mosaic virus, TMV). Jų identiškumas patvirtintas PGR technologiniais testais, naudojant pagal nukleotidines sekas parinktas specifinių oligonukleotidų poras. Elektroforezės akrilamidiniuose geliuose gautų DNR fragmentų amplifikacijos PGR produktų (364 bp, 540 bp ir 422 bp) dydžių analizė patvirtino TRV, CMV ir TMV (atitinkamai) identifikavimą meškiniuose česnakuose. Tai yra pirmasis pranešimas apie šių virusų apraiškas meškiniuose česnakuose Lietuvoje.

The present paper reports about the occuring ramson garlic (Allium ursinum L.) plants naturally infected with virus diseases. Diseased ramson garlic plant samples were collected from the districts of Vilnius, Kaišiadorys and Jurbarkas. The affected ramson garlic plants showed chlorotic striping or mottling, mild mosaic and currling of leaves. The identification of causal agents has been based on the data of host range, symptom expression on test plants and morphology of virions using transmission electron microscopy (EM), and by using of specific oligonucleotide primer pairs in reverse transcription-polymerase chain reaction. The viruses infected a wide experimental host ranges and developed specific symptoms of Cucumber mosaic virus (CMV), Tobacco rattle virus (TRV) and Tobacco mosaic virus (TMV). EM investigation revealed presence of the mixed infection of viruses with different morphology of particles was detected in EM preparations of naturally infected ramson garlic samples, as well as of infected test plants. The primer pairs designed on the basis of published sequences were applied for amplification of CMV, TRV and TMV RNA fragments in RT-PCRs using virus infected A. ursinum plants. Analysis of PCR products in acrylamide gel electrophoresis revealed amplification of 540 bp, 365 bp and 422 bp fragments which were in agreement with size of the fragments expected from the sequence data. This is the first report of virus disease agents detected in A. ursinum plants in Lithuania.