Please use this identifier to cite or link to this item:https://hdl.handle.net/20.500.12259/36245
Type of publication: master thesis
Field of Science: Biologija / Biology (N010)
Author(s): Barštaitis, Lukas
Supervisor: Sarapinienė, Ieva
Title: Rab14 GTPazės įtaka navikinių ląstelių dalijimuisi ir invazyvumui
Other Title: The role of Rab14 GTPase in cancer cell proliferation and invasiveness
Extent: 53 p.
Date: 25-May-2018
Event: Vytauto Didžiojo universitetas. Gamtos mokslų fakultetas. Biologijos katedra
Keywords: Citokinezė;Tarpinis kūnelis;Cytokinesis;Midbody;Invazyvumas;Invasiveness
Abstract: Ląstelių atsiskyrimo mechanizmas yra siejamas su ląstelių diferenciacija, audinių morfogeneze ir onkogeneze. Atsiskyrimui yra svarbi endosomų pernaša į tarpląstelinį tiltą, valdoma Rab baltymų. Šių baltymų ekspresijos sutrikimai siejami su navikiniais susirgimais. Nors ląstelių atsiskyrimo mechanizmai nėra aiškūs, Rab14 baltymai aptinkami tarpinio kūnelio sudėtyje ir yra svarbūs ląstelių dalijimuisi. Šio darbo tikslas buvo įvertinti Rab14 GTPazės įtaką navikinių ląstelių dalijimuisi ir invazyvumui. Ląstelių dalijimasis buvo tiriamas imunocitocheminiu metodu, o invazyvumas įvertintas „žaizdos gijimo“ metodu. Tyrimams atlikti buvo naudojamos HeLa ląstelės ir HeLa ląstelės su skirtinga Rab14 baltymo ekspresija: HeLa-Rab14-KD – ląstelės su išveiklintu Rab14 baltymu, HeLa-Rab14-KO – ląstelėse neekspresuojamas Rab14 baltymas, HeLa-FLAG-Rab14-Q70L – ląstelių linija su padidinta Rab14 baltymo ekspresija, o dėl Q70L mutacijos Rab14 baltymas yra aktyvioje GTP būsenoje. Nustatyta, kad Rab14 baltymas yra svarbus ląstelių dalijimuisi ir jų judrumui. Ląstelėse sumažinus Rab14 baltymo ekspresiją, sutrinka ląstelių dalijimasis, dėl to padaugėja daugiabranduolių ląstelių. Tuo tarpu invazyvumo tyrimai parodė, kad Rab14 baltymo išveiklinimas ląstelių judrumą paveikia neigiamai. Padidinta Rab14 baltymo raiška ląstelių dalijimuisi įtakos neturėjo, tačiau pastebėta, kad tokiu atveju padidėja jų invazyvumas. Šios ląstelės, lyginant su tiriamosiomis ląstelėmis, taip pat buvo linkusios formuoti daugiau membraninių tunelinių nanovamzdelių. Galiausiai buvo nustatyta, kad suaktyvinus Wnt signalinį kelią padidėja Rab14 baltymo ekspresija, o ląstelių dalijimasis sutrinka, dėl to padidėja daugiabranduolių ląstelių skaičius.
Cell division is associated with cell differentiation, tissue morphogenesis and oncogenesis. Recirculating endosome trafficking to intercellular bridge is important for abscission and this process is controlled by Rab proteins. The distorsion of these proteins are associated with cancerous diseases. Even though, cell division mechanisms have not been completely established yet, Rab14 definetely plays an important role in cell division and it is a part of the midbody. The aim of this study was to evaluate the effect of Rab14 GTPase to cancer cell proliferation and invasiveness. Cell division was evaluated by immunocitochemistry and cell mobility was assessed by wound healing assay. HeLa cells and its derivatives with different expression of Rab14 were used in this study: HeLa-Rab14-KD – Rab14 protein expression is reduced, HeLa-Rab14-KO – Rab14 protein is not expressed, HeLa-FLAG-Rab14-Q70L – Rab14 expression is increased and Rab14 is in a GTP-bound active state. It was determined that Rab14 is important for cell division and mobility. Reduced expression of Rab14 disrupts cell division and as a result, causes multi-nucleation in dividing cells. Meanwhile invasiveness assay showed that reduced Rab14 expression negatively affects cell mobility. On the other hand, increased Rab14 expression did not affect cell division, but still increased cell mobility. Also, these cells were more prone to form membranous tunneling nanotubes than compared to other types of cells. Lastly, it was determined that activation of Wnt signaling pathway increases the expresion of Rab14, causing a disruption of cell division, which leads to a multi-nucleation of dividing cells.
Internet: https://hdl.handle.net/20.500.12259/36245
Appears in Collections:2018 m. (GMF mag.)

Files in This Item:
lukas_barštaitis_md.pdf1.33 MBAdobe PDF   Restricted AccessView/Open

Show full item record
Export via OAI-PMH Interface in XML Formats
Export to Other Non-XML Formats


CORE Recommender

Page view(s)

37
checked on Jun 6, 2021

Download(s)

9
checked on Jun 6, 2021

Google ScholarTM

Check


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.