Polikloninių antikūnų – magnetinių dalelių konjugatų gamybos tobulinimas

Abstract

Jungiant magnetines daleles su antikūnais susidaro magnetinių dalelių ir antikūnų konjugatai. Baigiamajame darbe buvo siekiama patobulinti magnetinių dalelių ir polikloninių antikūnų konjugatų gamybos technologiją sutrumpinant proceso trukmę. Patobulinus konjugatų gamybos sąlygas galėtų sumažėti medžiagų sąnaudos ir sutrumpėti gamybos trukmė. Baigiamajame darbe ištirti veiksniai, darantys įtaką konjugacijai: temperatūra, konjugacijos trukmė, ultragarso poveikis ir antikūno kiekis. Pakeitus tiriamuosius veiksnius, patikrintas magnetinių dalelių ir antikūnų konjugatų funkcinis stabilumas, konjugacijos metu neprisijungusio ir funkciškai aktyvaus antikūno kiekis supernatante. Taip pat buvo nustatyta, kad konjugacijos metu antikūno kiekį sumažinus daugiau nei 15%, konjugatai netenka funkcinio stabilumo ir neefektyviai atskiria ląsteles.

Magnetic beads associated with antibodies are defined as conjugates. The aim of this study was to improve production of antibody-magnetic bead conjugates to reduce reaction time. Optimization of conjugation reaction conditions could lead to economic benefits – the cost of materials could be reduced, the production time could be shortened. In this work the impact of factors effecting conjugation - temperature, conjugation time, sonication effect on the beads and amount of antibodies used for conjugation - was investigated. Functionality of conjugated magnetic beads was evaluated after optimization of reaction conditions. In adddition, it was observed that conjugated beads lost their ability to effectively isolate cells after reducing antibody amount in conjugation reaction mixture by more than 15%.