Žmogaus α-laktalbumino ir oleino rūgšties komplekso citotoksiškumas kolorektalinio vėžio modelyje in vitro

Abstract

Kolorektalinis vėžys yra trečias dažniausiai nustatomas vėžinis susirgimas pasaulyje, vien 2018 metais nusinešęs 881 tūkst. gyvybių. Nepaisant pasitelkiamų įvairių gydymo metodų, sergamumo ir mirtingumo rodikliai išlieka aukšti, o naudojamų priemonių veiksmingumas ganėtinai žemas. Šio tyrimo tikslas buvo ištirti HAMLET (Human Alpha-lactalbumin Made LEthal to Tumor cells), žmogaus α-laktalbumino ir oleino rūgšties komplekso, citotoksiškumą kolorektalinio vėžio ląstelių linijoms, turinčioms skirtingą KRAS mutacijos statusą. KRAS laukinio tipo (Caco-2) ir KRAS mutaciją turinčios (LoVo) ląstelės 6 val. buvo veikiamos skirtingomis HAMLET koncentracijomis. Ląstelių gyvybingumo pokyčiai įvertinti naudojant MTT ir kolonijų formavimo testus. O ląstelių žūties būdo nustatymui naudotas tėkmės citometrijos metodas. Rezultatai rodo, jog komplekso citotoksiškumas tirtoms ląstelėms buvo proporcingas jo koncentracijai, o efektyvumas nepriklausė nuo KRAS mutacijos statuso. Tačiau po poveikio HAMLET kompleksu nebuvo nustatytas apoptotinių ląstelių kiekio padidėjimas, todėl reikalingi tolimesni tyrimai.

Colorectal cancer is the third most common cancer globally, and is responsible for an estimated 881 thousands deaths in 2018. Despite variety of treatments, the incidence and mortality still remain high, and effectiveness of currently using treatment is relatively low. The aim of this study was to investigate cytotoxic activity of the HAMLET (Human Alpha-lactalbumin Made LEthal to Tumor cells), a complex formed by human α-lactalbumin and oleic acid, on colorectal cancer cell lines with different KRAS mutation status. KRAS wild type (Caco-2) and cells with KRAS mutation (LoVo) were treated with different concentrations of HAMLET for 6 h. Changes in viability were evaluated using MTT and colony forming assays. The mode of cell death induced by HAMLET was examined using flow cytometry assay. Results suggest that complex exhibited cytotoxicity in a dose-response manner and its efficacy did not depend on KRAS mutation status. However, there did not observe increases in apoptotic cell number after exposure to HAMLET, so further analysis is required.