Propidžio jodido ir siRNR elektropernašos į ląsteles in vitro, bei elektroporacijos in silicio, palyginimas
Daunys, Matas |
Elektroporacija yra fizikinis metodas leidžiantis pasitelkiant išoriniu elektriniu lauku padidinti biologinių objektų membranų laidumą. Šiame darbe nagrinėjama mažų molekulių (propidžio jodido) ir siRNR elektropernašos in vitro mechanizmai į Kiniško žiurkėnuko kiaušidžių (CHO) ląsteles. Pasitelkiant literatūros apžvalgoje studijuotą medžiagą, pritaikomi elektroporacijos in silica matematiniams modeliams apskaičiuoti ir palyginti. Eksperimentų metu gautais duomenimis parodoma jog siRNR ir propidžio jodido elektrotransportavimas per membraną elektroporacijos metu skiriasi. Propidžio jodido elektropernašai į ląsteles išorinio elektrinio lauko stipris turi didesnę įtaką, nei išorininio elektrinio lauko veikimo trukmė. Tuo metu siRNR elektropernašai į ląsteles išorinio elektrinio lauko veikimo trukmė turi didesnę įtaką, nei išorininio elektrinio lauko stipris. Rezultatais parodoma, jog propidžio jodido ir siRNR elektropernašoje didelę įtaką daro elektroforetinės jėgos, tačiau dėl didesnio siRNR molekulės krūvio, elektropernaša į ląsteles prie LV elektrinių impulsų vyksta intensyviau.
Electroporation is a method that uses electric fields to increase the permeability of biological membranes. Within this work, the electrotransport of propidium iodine and siRNA are analyzed. The mechanism of both molecules are compared with each other, as well as with the theoretical math models of in silica electroporation. Data collected through experiment is analyzed to show that propidium iodine ant siRNA molecules interact differently when exposed to external electric field. For more efficient electrotransfer of propidium iodine, it is important to use stronger external electric field pulses, while this is opposite for siRNA. For more efficient electrotransfer of siRNA molecules, longer electric pulses should be used. This is due to the phoretic forces which act upon these molecules when exposed to external electric fields.